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                饲料中L-肉碱的高效液相色谱(HPLC)检测方案
                信息来源:[网络] 上传时间:2013-04-26

                   旋肉碱L-肉碱)又称肉毒碱,是一种水溶性氨基酸,由赖氨酸衍生而来。分子结构为L-γ-三甲胺β-羟丁酸,分子式为C7H16NO3,分子量为161.2。它是B族维生素类似物,曾被称为维生素BT。其分子结构中含有一个可供脂肪酸脂化的羟基,其饱?#22270;图?#24615;官能团有良好的水溶性和吸湿性,200℃以上它仍稳定存在,可在PH3~6的溶液中放置一年以上而不变坏。1998年我国卫生部将L-肉碱批准为食品添加剂,列入营养强化剂类。

                  科晓仪器公司利用全新高?#38405;?#30340;LC-10B高效液相色谱仪,经?#23548;?/SPAN>检测饲料中L-肉碱的含量,得出的结果准确可靠,检出限好,适用于饲料中L-肉碱的测定,供广大用户参考。

                  以下是饲料中L-肉碱的详细检测方法

                1  仪器与试剂

                1.1 仪器
                  
                LC-10B高效液相色谱仪
                  Vertex 色谱柱 C18  250mm×4.6mm×5μm
                  实验?#39029;?#29992;仪器设备
                  超声波水浴
                  分析天平(感量0.001g
                  0.45μm水性?#22235;?SPAN lang=EN-US>

                1.2 试剂  
                  异丙醇,色谱纯。
                  甲醇,色谱纯。
                  乙腈,色谱纯。
                  磷酸氢二钠。
                  磷酸二氢钾。
                  三乙?#21450;貳?SPAN lang=EN-US>
                  柠檬酸。
                  氧化银。
                  肉碱衍生剂。

                2  测定原理
                  样品经加乙醇超声提取后,然后加入肉碱衍生剂,将衍生物注入高效液相色谱反相柱上进行分离,用紫外检测器在210nm波长处定量测定。

                3  试样溶液的制备
                  称取5g试样于100ml烧杯中,加入30ml无水乙醇,溶解并转移至100ml容?#31185;?#20013;,先后用10ml无水乙醇分3次洗?#30001;?#26479;,样液转移至100ml容?#31185;?#20013;,超声提取10min后用无水乙醇定容?#37327;?#24230;,混匀后于4000r/min离心5min。取上清液2ml,加入肉碱衍生剂0.25ml(衍生剂配制方法:40 mg P-苯酰溴溶解于1.0 ml乙腈,加入40% 氢氧化四丁基铵50 µl),混合后置于60℃恒温水温箱120 min,吸取20 µl进样分析。

                4  色谱条件
                  色谱柱:Vertex C18柱 250mm×4.6mm×5μm
                  流动相?#26477;?#37255;:磷酸盐=5:95
                  流速:1.0mL/min
                  温度:室温;
                  进样量:20μL
                  检测波长:210nm

                更多检测方案请?#33519;?#19982;科晓仪器0571-88955439联系。


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